犬細粒棘球絳蟲(chóng)抗原ELISA試劑盒使用說(shuō)明書(shū)

犬細粒棘球絳蟲(chóng)抗原ELISA試劑盒使用說(shuō)明書(shū)

【產(chǎn)品名稱(chēng)】

通用名稱(chēng)：犬細粒棘球絳蟲(chóng)抗原ELISA檢測試劑盒

英文名稱(chēng)：Hydatid（ Hyd） coproantigens Test Kit for Canine.

【用途】 本試劑盒采用夾心ELISA方法定性檢測犬糞細粒棘球絳蟲(chóng)抗原。

【規格】 96T/盒

【儲藏與有效期】 2～8℃保存，有效期12個(gè)月。

【試劑盒組成】

【犬細粒棘球絳蟲(chóng)抗原ELISA試劑盒使用說(shuō)明書(shū)溶液配制】

1. 洗滌液配制：用蒸餾水或去離子水將洗滌液 10×按 1:9 稀釋?zhuān)浞只靹蚣礊楣ぷ鳚舛认礈煲骸?/span>

2. 樣品稀釋液配制：用蒸餾水或去離子水將樣品稀釋液 2×按1:1 稀釋?zhuān)ㄈ缛?/span>100mL 濃縮樣品稀釋液加 100mL 蒸餾水或去離子水），充分混勻即為工作濃度樣品稀釋液。

【實(shí)驗準備】所有試劑使用前恢復至室溫(25℃左右)，以免溫度過(guò)低影響抗原抗體反應。

【樣品要求】
1. 本試劑適用于檢測犬糞樣品；
2. 應采集新鮮的犬糞樣品進(jìn)行測試。若不能及時(shí)檢測，應將糞樣低溫凍存，防止反復凍融。如犬糞難以溶解，應適當搗碎處理。

【操作步驟】

1. 樣品處理：犬糞樣品需要預先低溫（ -70℃以下） 冷凍 7 天以上，以滅活蟲(chóng)卵。稱(chēng)取 1克犬糞,加入1mL樣品稀釋液，充分攪拌混勻，靜置10分鐘，再3000rpm離心10分鐘，取上清液待檢。
2. 加樣反應：樣品孔，每孔僅加入100μL待檢樣品；陰性對照2孔，每孔僅加入100μL陰性對照品；陽(yáng)性對照 2 孔，每孔僅加入 100μL 陽(yáng)性對照品。蓋好封板膜，37℃避光反應30分鐘。

3. 洗板：甩去孔內液體，每孔注滿(mǎn)工作濃度洗滌液洗板3 次，每次均需靜置1分鐘；最后一次甩凈，拍干。

4. 加酶反應：每孔加酶結合物100μL，蓋好封板膜，37℃避光反應30分鐘。甩去孔內液體，如上洗板，拍干。

5. 顯色反應：按所需用量，臨用前取等體積底物液和顯色液充分混勻后每孔加100μL，蓋好封板膜，37℃避光反應10分鐘。

6. 終止反應：加終止液50μL，用酶標儀于450nm波長(cháng)（630nm作為參比波長(cháng)）讀取OD值。

【結果判定】

1. Cut-off 值（COV）=陰性對照平均OD值×2.1（陰性對照孔OD 值＜0.15 時(shí)按0.15計）。
2. 有效性判定：
陰性對照孔 OD 值≤0.30（ 若大于 0.30 則實(shí)驗無(wú)效）；
陽(yáng)性對照孔 OD 值≥0.50（ 若小于 0.50 則實(shí)驗無(wú)效）。

【判定標準】

樣品 OD 值≥COV， 判為犬細粒棘球絳蟲(chóng)抗原陽(yáng)性；
樣品 OD 值＜COV， 判為犬細粒棘球絳蟲(chóng)抗原陰性。

【檢驗方法的局限性】本試劑盒僅供篩查，不作為確診依據。

【注意事項】

1. 所有試劑使用前恢復至室溫(25℃左右)，以免溫度過(guò)低影響抗原抗體反應。

2. 實(shí)驗前應用溫度計檢查溫箱溫度，溫度過(guò)高或過(guò)低影響OD值高低。

3. 包被板反應時(shí)嚴禁堆疊放置，應該平鋪且板間有空隙，不要離溫箱壁太近。

4. 實(shí)驗所用移液器及設備應定期校準。

5. 底物液和終止液對皮膚有刺激性，請帶手套注意個(gè)人防護。

長(cháng)期提供原核、真核蛋白表達構建服務(wù)

長(cháng)期 提供抗原偶聯(lián)、 HRP、生物素、糖基化、親和素、FITC等偶聯(lián)標記多肽、抗體、抗原、蛋白等服務(wù)