你想要的鼠抗重金屬類單克隆抗體上線了！

　　為了利用抗體庫篩選技術(shù)制備檢測重金屬鉻的單克隆抗體，本鼠抗重金屬類單克隆抗體研究利用整合劑DTPA成功制備了重金屬Cr的*抗原，并利用制備的*抗原結(jié)合噬菌體展示技術(shù)成功篩選到了特異性識(shí)別Cr-DTPA的噬菌體抗體Cr-DTPA-VHH4-63。結(jié)果顯示，獲得的抗體親和常數(shù)為1.279x10"L/mol，與載體蛋白BSA/OVA及無金屬抗原DTPA-BSA/0VA均無交叉反應(yīng)，與其他金屬離子也沒有交叉反應(yīng)，特異性強(qiáng)。利用制備的Cr-DTPA噬菌體抗體初步建立了ELISA免疫檢測法，其方法低檢測限達(dá)到1ug/L，水樣加標(biāo)回收試驗(yàn)平均回收率90%-114%6，達(dá)到國家飲用水檢測標(biāo)準(zhǔn)，可用于農(nóng)業(yè)淄溉用水及生活飲用水中的重金屬鉻的檢測。

　　本鼠抗重金屬類單克隆抗體研究以谷胱甘肽（GSH）作為雙功能螯合劑偶聯(lián)Hg2+和匙孔血藍(lán)蛋白（KLH），獲得*抗原KLH-GSH-Hg2+。用該抗原在佐劑的輔助下免疫BALB/C小鼠。免疫5次后，用間接ELISA方法檢測免疫小鼠抗血清，含Hg2+抗原(BSA-GSH-Hg2+)檢測OD值遠(yuǎn)大于無Hg2+抗原（BSA-GSH）。此后經(jīng)過細(xì)胞融合、雜交瘤篩選以及克隆化等步驟，建立了穩(wěn)定分泌抗重金屬Hg2+的單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞株2C3，后用小鼠體內(nèi)誘生法生產(chǎn)抗Hg2+腹水型單抗，其效價(jià)為1:51200。

 

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