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Nu-P01植物組織PCR試劑盒(免核酸提?。?/h1>

簡(jiǎn)要描述:本試劑盒適用于煙草、擬南芥、水稻、大豆、油菜、玉米、小麥等葉片和種子的PCR、熒光定量PCR 檢測。使用該試劑盒無(wú)需液氮研磨,無(wú)需使用有機試劑,無(wú)需重復離心便可獲得用于PCR反應的基因組模板。
依托Nu-Smart&#174;平臺DNA-Lysis采用zhu利配方,5分鐘內獲得花瓣、花蕊、種子、葉片、根、莖等樣本的基因組DNA。葉片僅僅需取材1-4mm,取樣量小,減少對樣品的損耗。

  • 產(chǎn)品型號:
  • 廠(chǎng)商性質(zhì):生產(chǎn)廠(chǎng)家
  • 更新時(shí)間:2023-04-27
  • 訪(fǎng)  問(wèn)  量:497

詳情介紹

NuSmart®植物組織PCR試劑盒

(免核酸提?。?/span>

試劑盒應用

本試劑盒適用于煙草、擬南芥、水稻、大豆、油菜、玉米、小麥等葉片和種子的PCR、熒光定量PCR 檢測。使用該試劑盒無(wú)需液氮研磨,無(wú)需使用有機試劑,無(wú)需重復離心便可獲得用于PCR反應的基因組模板。

依托Nu-Smart®平臺DNA-Lysis采用zhuan利配方,5分鐘內獲得花瓣、花蕊、種子、葉片、根、莖等樣本的基因組DNA。葉片僅僅需取材1-4mm,取樣量小,減少對樣品的損耗。

預制的2×TaqMix (With Dye)只需要加入引物和模板DNA即可進(jìn)行PCR反應,減少移液次數,實(shí)現高通量擴增。該體系中添加有電泳緩沖液和染料,PCR結束后直接進(jìn)行瓊脂糖凝膠電泳,使用方便快捷。

本試劑盒僅供研究使用,不可用于臨床、食品、化妝品等領(lǐng)域。

 

試劑盒組成

組分

Nu-P010150T

Nu-P0102250T

DNA-Lysis

1 mL

5 mL

2×TaqMix (With Dye)

500 μL

2×1.25mL

 

保存條件

-20oC保存。

使用前將DNA-Lysis室溫充分混勻,經(jīng)常使用可4℃保存。

2×TaqMix (With Dye)溶解后需置于冰上,避免反復凍融。

 

需要準備

金屬恒溫浴、PCR

 

使用方法

一、不同樣品的處理方法

1. 葉片的處理

1)用眼科剪或葉片取樣器剪取1-4mm葉片。

2加入20 μL DNA-Lysis。

3充分混勻。

4置于55℃作用5分鐘。溶液即為DNA模板。

 

2. 種子和果實(shí)的處理

1研磨后種子或1-2mm果肉放入離心管中。

2加入20 μL DNA-Lysis。

3充分混勻。

4置于55℃作用5分鐘。

510,000rpm離心1分鐘,上清即為DNA模板。

 

二、推薦PCR反應體系


20 μL體系(推薦)

50 μL體系

2×TaqMix (With Dye)

10 μL

25 μL

引物1 (10 μM)

1 μL

2 μL

引物2 (10 μM)

1 μL

2 μL

DNA模板

0.5-2 μL

0.5-3 μL

ddH2O

補足至20 μL

補足至50 μL

※:引物濃度可以在0.1-0.5 μM范圍內進(jìn)行調節。

 

三、按照以下方法設定PCR反應

步驟

溫度

時(shí)間

循環(huán)數

預變性

95 oC

5 min

1

變性

95 oC

15-30 s

 

35-40

退火

50~72 oC

30 s

延伸

72 oC

1 kb/min

徹di延伸

72 oC

5 min

1


4 oC

Hold

1

 

注意事項

一、試劑盒使用前注意事項

1)所有試劑應按照zhi定溫度儲存。請勿反復凍融。

2)使用前后均需要對操作區進(jìn)行消毒,消毒方式可以采用75%乙醇或核酸消除劑等。耗材均需使用商品化的無(wú)酶耗材。

3DNA-Lysis頻繁使用,可在4℃保存。長(cháng)期不使用可放-20℃保存。

二、樣本注意事項

(1)不同葉片使用不同的取樣器進(jìn)行處理,防止交叉污染導致檢測結果偏差。

(2)葉片剪取不宜過(guò)大,以1-4mm為宜。

(3)種子樣本大小不一,建議研磨后使用。

三、試劑盒使用過(guò)程中注意事項

(1)PCR過(guò)程中推薦使用陰性對照和陽(yáng)性對照。

(2)整個(gè)過(guò)程中使用的吸頭、離心管等耗材應丟棄在含有75%乙醇或核酸消除劑的容器中,減少環(huán)境污染。

(3)2×TaqMix (With Dye)包含染料,可在反應結束后直接進(jìn)行瓊脂糖凝膠電泳。

(4)不能使用其他品牌的taq酶,進(jìn)行PCR擴增檢測。

四、試劑盒使用后注意事項

(1)DNA-Lysis處理后的DNA模板可在-20℃保存至少1個(gè)月,如需長(cháng)期保存,可離心后取上清置-80℃保存。避免反復凍融,防止基因組斷裂。

(2)PCR反應完成后,嚴禁在實(shí)驗區開(kāi)蓋。應在污染區進(jìn)行瓊脂糖凝膠電泳,防止氣溶膠污染。

(3)為防止試劑盒污染,請勿將不同批號試劑盒混用。


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