解析鼠抗黃曲霉毒素B1單克隆抗體中的黃曲霉毒素B1

　　鼠抗黃曲霉毒素B1單克隆抗體中的黃曲霉毒素B1存在于谷物、堅(jiān)果、棉花籽及其他食品或飼料中，具有很強(qiáng)的致癌性，對(duì)人和若干動(dòng)物具有強(qiáng)烈的毒性，其毒性作用主要是對(duì)肝臟的損害。本抗體為黃曲霉毒素B1單克隆抗體，該抗體可應(yīng)用于ELISA、膠體金、免疫親和柱層析等免疫檢測(cè)。
 

　　黃曲霉毒素B1在自然界分布的黃曲霉中，約有20%的菌株能產(chǎn)生黃曲霉毒素。其中花生、玉米、黃豆及棉籽等作物與其副產(chǎn)品易感染黃曲霉毒素，含黃曲霉毒素量較多，食入后在動(dòng)物體內(nèi)主要存在于如肝臟、尿與糞便中。黃曲霉毒素是一種肝臟毒素，能引起肝細(xì)胞變質(zhì)、壞死、出血；目前，黃曲霉毒素的酶聯(lián)免疫法，免疫膠體金法等檢測(cè)方法均需要黃曲霉毒素抗原抗體。
 

　　黃曲霉毒素B1的合成方法：
 

　　(1)黃曲霉毒素半抗原合成
 

　　20-100mg黃曲霉毒素溶于丙酮中，10%硫酸中，于60℃攪拌反應(yīng)，3h后，蒸干丙酮，洗滌4次，蒸干后得到黃曲霉毒素半抗原。
 

　　(2)黃曲霉毒素全抗原(人工抗原、*抗原、酶標(biāo)抗原)合成
 

　　將黃曲霉毒素半抗原與牛血清白蛋白偶聯(lián)得到免疫抗原。
 

　　取60mg牛血清白蛋白溶于9.5mlPBS(0.01mol/L,pH5.0)溶液中，加入50微升室溫?cái)嚢?h，用0.01mol/LPBS透析3天，每天換3次透析液，得到黃曲霉毒素與牛血清白蛋白的免疫抗原。